疫苗研究的路径调亮:发光报告检测病毒中和抗体

研制疫苗是安全,有效,方便地制造和销售是一项艰巨的任务。然而,这正是我们需要的响应COVID-19大流行。疫苗开发,安全性和有效性的测试需要时间。在腮腺炎疫苗被认为是有史以来最快的传染病疫苗,它的发展需要四年后样品采集到牌(2)。不过,也有很多理由期待一个COVID-19疫苗更快的发展:研究人员正在以前所未有的方式进行合作,最COVID-19科学出版物都是免费提供给所有访问,往往可作为预印本。随着2020年8月11日的,世界各地的研究人员已经开发超过165个候选疫苗,其中30间为人体临床试验(1)的某些阶段。提供给科学家疫苗制剂的范围已经扩大到包括RNA和DNA疫苗,复制缺陷型腺病毒的疫苗,灭活疫苗或灭活疫苗和亚单位蛋白质的疫苗。同样重要的是,疫苗开发者和研究者有这样的生物发光记者,这有助于加快测试和开发,以强大的分子生物学工具更多的机会。

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一个艺术奖于岩石的照片吗?威斯康星大学麦迪逊分校的十年酷科技影像大赛

庆祝科学的艺术是后话了美国威斯康星大学麦迪逊分校酷科技影像大赛自成立以来一直在做10年前作为的一部分该文件为什么。2020年获奖的图像包括条目等不同的神经干细胞,眼睛球舔壁虎的视频,是的,摇滚的,甚至一张照片:tractolite的实际上是薄款,长石和橄榄石组成的火成岩附近的德卢斯明尼苏达收集形成元古宙中大陆裂谷。这张照片是由娜塔莉·贝兹博士的副主任收集科学的威斯康星大学麦迪逊分校硕士生物技术她的女儿安雅·沃特曼(Anya Wolterman)最近刚从麦卡利斯特学院(Macalester College)毕业,获得了地质学和物理学学位。娜塔莉与Promega和the有长期的联系生物制药技术中心研究所,所以我们向她伸出获得大赛参赛者的视角。娜塔莉接听两个她和她的女儿,而她的女儿离开做在落基山脉的一些踪迹维护,不发表评论。

这片由长石和橄榄石组成的火成岩的薄片是在明尼苏达州德卢斯附近的元古代中大陆裂谷中采集的。裂谷是由苏必利尔湖地区大陆板块碰撞造成的地壳撕裂。偏振光使色彩更加鲜艳。

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在罗莎琳·富兰克林诞辰100周年之际庆祝女科学家的成就

照片51是现在著名的X射线衍射图像,允许沃森和克里克以crystalize科学研究(从孟德尔到查加夫)的百年工作成解释了DNA可以作为基因的材料一个可行的结构模型。照片是通过精心罗莎琳德富兰克林博士,当代沃森和克里克的生产。虽然她和她的同事R.G.高斯林没有公布他们的工作在同一个问题自然作为沃森和克里克纸(1,2),他们的工作没有得到的是沃森和克里克的同公众的赞誉。

应用科学家的帮助合作伙伴和客户应用现有的技术,新的问题。阅读更多他们的工作。

女科学家一直在促进我们对世界的理解我们周围的整个历史。在这100th罗莎琳德·富兰克林博士的诞生周年之际,我们想花一点时间来识别的工作,女科学家在Promega公司做的。

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抗体,免疫和疫苗:一个短的引物的适应性免疫应答

MERS-CoV的信用:NIAID

我们的皮肤,呼吸系统和胃肠道不断受到环境的挑战来自像SARS-COV-2潜在的病原体轰炸。然而,因为我们的免疫系统保护我们这些风险不经常大碍。人体免疫系统是复杂的。它有损伤和疾病都迅速,非特异性反应,以及长期,病原体特异性应答。理解免疫反应是如何工作帮助我们理解一些病原体怎么弄过去,以及如何阻止这种情况发生。它还提供了帮助我们开发安全有效的疫苗的关键信息。

免疫反应涉及两个互补的途径:先天免疫和适应性免疫。先天性免疫是非特异性,快速,损伤或感染后很快发生。由于先天免疫反应的结果,细胞因子(小信号分子)分泌到募集免疫细胞到损伤或感染部位。先天免疫不发展的抗原或授予长期免疫的“记忆”。

免疫反应涉及互补途径:先天免疫和适应性免疫。

与先天免疫不同,适应性免疫既依赖抗原又具有特异性,这意味着适应性免疫反应需要有触发抗原的存在——类似于病毒表面的刺突蛋白。适应性免疫反应也针对触发反应的抗原。适应性免疫反应需要更长的时间来发展,但它有能力记忆形式的记忆B和T细胞。在随后的抗原暴露中,这种记忆能够使快速、特异性免疫反应(免疫)成为可能。

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利用分子生物学和生物化学检测血液兴奋剂

监测运动员中的使用性能增强的物质是复杂的,用于测试和检测使用这类物质的检测要求在过去的几十年显著改变。

的血液学(血液)模块运动员生物护照由世界反兴奋剂机构2009年通过的12月1日,(ABP)。该模块规定了标准协议来监控通过查看生物参数的变化掺杂的专业运动员,而不依赖于检测体液中的非法的化合物。这样的生物方法消除了需要开发和验证了测试,以检测可被用于掺杂的每一个新的化合物。总部基地的当前版本,在2014年通过的,还增加了从尿液样本监测的某些类固醇的使用指标。

血液兴奋剂,其目的是增加红细胞使更多的氧可以被输送到肌肉耐力增加或性能是特别难以检测。通常有三种方法,它是完成的:使用促红细胞生成素(EPO)或合成的氧载体和输血。尽管可以检测到大体积的血液或使用EPO的输血,微剂量的EPO或输血聚集的红血细胞的较小体积是更难检测。

尼古拉斯·洛伊恩贝格在瑞士实验室兴奋剂分析有同事开发了一种方法以检测血液掺杂。除了解决血液兴奋剂的检测,他的实验室还担心放宽对样品的运输和存储需求,并确保样品采集不运动员的表现产生不利影响。

改善血液样本的采集和存储

由于样本采集和存储是准确的测试结果非常关键,任何新的试验发展到从易于收集和储存的检测血液兴奋剂的好处。该实验室洛伊恩贝格调查使用的TAP™按钮收集装置,它被誉为采血用简单的方法,易于使用,并消除了痛苦的针扎或手指刺会影响运动员表现的需要。TAP收集之后,从装置的血液20μL置于到滤纸上并干燥(干燥的血液样本; DBS),其是从多站点集合来存储和运输更容易实验室。

血液兴奋剂的RNA生物标记

血液抽取和自体输血或重组人EPO注射刺激红细胞生成和幼红细胞可以基于它们的基因表达图谱进行区分。一个由幼红细胞表达的基因是aminoleuvulinate合酶2中,编码的酶ALAS2参与血红素,RBC成熟期间的通路活性的合成的基因。RNA转录物是不稳定的并且倾向于迅速降解,因此,从所收集的样品中分离线性的RNA转录物是困难的。然而环状RNA(circRNAs)是一类由预的mRNA是高丰度,相当稳定和维持细胞类型特异性表达的backsplicing产生的RNA分子组成。所述洛伊恩贝格实验室开发了一种方法,用于测量的线性和环状的形式ALAS2DBS中的RNA监测红细胞生成。

在开发这一协议的最大挑战之一是实现高效RNA提取仅20ul干血液。Leuenberger和他的同事采用了两步净化;从苯酚开始:在DBS上提取氯仿,然后在the上进一步纯化Maxwell®RSC自动化仪器, 使用麦克斯韦RSC miRNA的血清和血浆包。从手动切换到用于第二步骤的自动化方法是至关重要的。它减少了污染的可能性,以及减少移液误差,而不损害良好的质量和因此的RNA有助于测定再现性产率。到血液光斑内正常化卷,协议使用RNA产生由管家基因。自动化验工作已经发表在生物分析法。

下一步是什么

该协议被测试,以查看是否EPO或小输血微剂量也可通过在DBS监测ALAS2 RNA表达进行检测。兴奋剂分析的瑞士实验室还是开发的方法通过从全血样品中分离质粒DNA,以检测基因兴奋剂的过程中,使用麦克斯韦RSC

此外,所使用的收集和储存方法对临床,特别是对需要进行常规血液监测的患者有影响。分离环状rna的能力显示出潜力法医学应用识别体液。

10个技巧,以保持身体疏远的实验室

实验室可以为拥挤的地方。我们已经习惯了周围其他人的工作,折腾的想法来回。黑暗的房间,冷库和大型设备的空间往往是由几个实验室共享。一些实验室已经响应完全关闭COVID-19大流行;人,尤其是那些实验室做冠状左右生物学,试验和检测和药物开发研究的不断运行。对于那些实验室,维持推荐的6英尺(2米)的距离,以帮助阻止冠状病毒大流行是不容易的。

在Promega,我们的运营、质量保证、应用和研发实验室都已启动并投入运行,专注于为研究、诊断和开发治疗方案的合作伙伴提供尽可能多的支持新冠肺炎。与此同时,我们最大限度地提高我们员工的安全。以下是我们发现保持在我们的实验室临界距离,可能会帮助您的实验室组保持高效和安全的过几种方法。

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用于临床试验的RNA提取——不要在自家酿造中尝试这种方法

本博客与珍妮弗Romanin,高级总监IVD运营与全球服务和支持,罗恩惠勒,高级总监,质量保证和法规事务的Promega公司太多指导写

一趟下来记忆里

在过去的日子里,我们都要在雪地里走两英里上山去实验室,提取RNA和DNA就像在家里酿一样。你自己做缓冲液,自己准备柱,花几个小时裂解细胞,离心样本,收集荧光,溴化硼染色的RNA条带,在暗室从一个悬挂在紫外箱上方的试管中。就像啤酒酿造大师调整他们的协议来生产更好的啤酒一样,你也可以调整你的方法,成为RNA的“主隔离者”。您可能会得到大致一致的结果,但不能保证您的协议在新手手中也能工作得很好。

进入生物技术公司具有高度控制的条件比你家酿造方法提供更高质量和可重复性下生产的RNA和DNA提取试剂盒,试剂盒和列。这些系统使我们能够设计出更加敏感下游检测的测定法依赖于高品质的输入DNA和RNA,例如RT-qPCR测定,可以检测在仅含有数百个细胞拭子的特定RNA分子的存在。通过这些分析,从家庭酿造隔离污染物会导致假阳性或假阴性或简单地混为一谈的结果。与预先批准的标准协议以高度受控的环境中制造的试剂是用于超灵敏的测试和测定等用于检测SARS-CoV的-2(使COVID-19病毒)的那些关键的。

制造工具的科学家的科学

有迹象表明,必须,如果你产生将被发送到不同的实验室系统,由不同的人具有可变技能,但产生的结果可以比从实验室到实验室用于满足几个标准。

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构建协作研究网络,以解决罕见病

早期的2016年6月

克里斯很严重的腿疼和关闭约一个月。疼痛来了又走,慢慢的,但是有时极端强爬行。基于x射线的整形外科医师确诊撕裂腿筋这是好转。我们被送回家休息,冰敷他的肌肉。

一个星期天,克里斯在游泳池玩5个小时了,并没有畏缩一次。接下来的一周,他很好,所以他去练足球在周三和游泳队练习的第二天。11时30分,当晚他醒了呼天抢地。同样的腿。同一地点。再次回来。

后期2016年6月

我们在希腊都在度假。又开始疼痛,严重的紧张和可怕的,所以不好他无法睡觉平躺在床上。绝望中,我们在希腊住进了医院......当地儿科医生是美好的,并建议我们飞回家,看到一个骨科大夫尽快......一个可怕的飞行家:没有答案,在我们的胃坑。克里斯是在轮椅上。

2016年七月

我们终于拿到了骨科医生下令MRI。的MRI结果每一个家长担心什么:“白血病或淋巴瘤”,并转介到肿瘤学家。经过多次侵入性检查,肿瘤科医生说,这是可能不是癌症。我们觉得这样的救济,但我们留下没有答案,他所有的痛苦。我们转移到传染病。

2016年8月

传染病专家说他们不能培养任何东西,所以他们不相信克里斯有感染。再一次,不完整的答案。然后我们就去学风湿病。得不到任何答案的挫折感和我们的孩子仍在痛苦之中,让人心碎、孤独和恐惧。

基于骨活检和核磁共振的风湿病终于给了克里斯诊断:慢性复发性多灶性骨髓炎(CRMO常常发音简称“染色体”)。

好消息是:这是不是癌症;坏消息:很少有人知道关于CRMO,因为它是一种罕见的疾病。

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快速检测检测SARS-2冠状病毒在巴西开发

在联邦大学巴伊亚(UFBA),由古比奥·苏亚雷斯博士领导的实验室病毒,已开发利用快速和具体的实时PCR检测GoTaq 1步RT-qPCR的检测SARS-2-CoV的(以前称为2019-nCoV冠状病毒),这将导致呼吸道疾病COVID-19的。该麦克斯韦RSC器械用于从通过拭子或之前测定支气管洗涤收集到的口咽部分泌RNA的自动提取。该冠状病毒特异性鉴别可以缩短由48 Hours识别SARS-2-CoV的〜3小时(1)时,及时向公共卫生官员提供关键信息。

“Promega一直为我们提供标准PCR和实时PCR以及核酸提取的试剂。这是一个我可以信赖的关系;他们是我们的合作伙伴,在技术和资金上都提供了出色的支持。Promega是我们所有试验的基础。”古比奥·苏亚雷斯博士

苏亚雷斯博士的实验室有开发鉴定和检测新出现的病毒病原体的分析方法的经验。他们的实验室首次发现Zika病毒的病原体的大暴发急性exanthematous疾病(AEI) 2015年4月在巴西东北部(2)。Zika病毒最终被宣布为突发公共卫生事件的国际重要性由世界卫生组织在2016年2月,头小畸型的发生率增加后发现婴儿的妇女在怀孕期间感染。在管理寨卡病毒危机中吸取的许多教训告诉我们,科学家正在如何处理sars -2冠状病毒。寨卡病毒应对的特点是在全球科学实验室之间共享数据、样本和资源的协作精神。

下面是来自巴西的描述对SARS-2-CoV的苏亚雷斯博士的小组工作视频链接(葡萄牙语音频)。https://globoplay.globo.com/v/8302334/

引用来源

  1. 电视巴伊亚在UFBA开发的3个小时可识别冠状病毒(2020)测试,说研究员。[互联网:https://g1.globo.com/ba/bahia/noticia/​​2020/02/07/teste-desenvolvido-na-ufba-pode-identificar-coronavirus-em-3h-diz-pesquisador.ghtml访问:2020年2月19日]
  2. 桑德勒,N.(2016)兹卡:个人观点,全球应对Promega公司。[互联网:https://www.promega.com/Resources/PubHub/Inspiration/Zika%20Perspectives%20Responses/访问:2020年2月19日]

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