DNA模板长度如何影响无细胞系统中的基因表达?

3D耦合转录/翻译剪影在细胞自由系统中。最近的纸张看着DNA模板长度对基因表达的影响。

无细胞基因表达系统是研究人员寻求了解转录和翻译调控的主要工具。影响无细胞基因表达效率的因素很多,包括载体序列、反应组分和模板DNA浓度。一个尚未被广泛研究的因素是DNA模板长度如何影响基因表达。

最近的一项研究西等。看着DNA模板的长度如何利用线性化的报告载体终止萤火虫荧光素酶(所述)对无细胞系统影响基因表达(卢克)。该研究比较的模板长度为:1717 bp,4331 bp和25,690 bp(卢克1.7k,卢克4.3k和卢克25). Nishio等人发现卢克25.7k比with高1000倍卢克1.7K,表明每个靶基因的蛋白质产量增加了较长模板的1000倍,卢克25.7k。在他们的比较中卢克1.7K和卢克4.3k,他们还注意到表达水平增加卢克4.3 k。作者认为,在这项研究中,较长的DNA分子表现出一种“收缩构象”,这有效地增加了DNA周围RNA聚合酶和NTPS的局部浓度。

方法

在体外进行无细胞基因表达TnT®T7快速耦合转录/翻译系统. TnT®耦合转录/翻译系统提供了一种简化和加速的体外蛋白质翻译方法。这些系统已被证明可用于许多下游应用,包括但不限于谷胱甘肽-S-转移酶(GST)下拉、凝胶转移分析、共免疫沉淀、蛋白质修饰表征、蛋白质:蛋白质和蛋白质:核酸相互作用和蛋白质活性研究。荧光素酶的水平是使用萤光素酶检测系统

文学引用

  1. 西尾,T.,吉川,Y.,吉川,K。(2021)DNA越长,无细胞基因表达的潜力就越大科学培训11,11739
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加里·科布斯

战略营销经理美国普洛麦格公司
加里于1982年在华盛顿大学麦迪逊分校获得细菌学学士学位。从1982年到1986年,他在华盛顿大学麦迪逊分校担任研究技术人员。从1986年至今,Gary一直在Promega Corporation担任多个职务,包括Promega Notes的第一任编辑。他还曾担任技术服务和培训经理、限制/修饰酶产品经理、蛋白质分析产品经理,现在担任蛋白质分析营销经理。bob体育电竞app

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