调查雷德斯韦尔作为SARS-2-COV的可能治疗(2019年 - NCOV)

Remdesivir(RDV或GS-5734)用于治疗美国SARS-COV-2的第一种情况(1)(1)。RDV不是任何国家的批准药物,但已通过全球许多机构要求帮助打击SARS-COV-2病毒(2)。RDV是一种腺嘌呤核苷酸单磷酸酯类似物,用于抑制埃博拉病毒复制(3)。RDV在细胞内生物活化,并用作复制必要的RNA依赖性RNA聚合酶(RDRP)的替代底物。掺入底漆延伸产物的早期终止导致抑制作用。

注意装饰病毒外表面的尖峰,这在显微镜上观察电子时赋予病毒群岛周围的电晕的外观。在该视图中,蛋白质颗粒E,S,M和He也位于颗粒的外表面上,也已被标记。新型冠状病毒病毒被确定为2019年在中国武汉首次检测到呼吸道疾病爆发的原因。
在疾病控制和预防中心(CDC)的中心,揭示了冠状病毒表现出的超微结构形态。照片学分:Alissa Eckert,MS;丹希格斯,麦姆纳姆

为什么对RDV的所有兴趣作为SARS-COV-2的治疗?在RDV的大部分兴趣是由于北卡罗来纳大学(Ralph S. Baric)和Villbilit大学医疗中心(Mark R. Denison的实验室)合作进行了一系列研究,与Gilead Sciences合作。

冠状病毒复制依赖于病毒RDRP,也可以复制。切山,(4)尽管RDV,GS-441524的核苷早期报告(5)对SARS冠状病毒无效,但仍决定检测RDV对冠状病毒复制的影响。切汉和同事发展Nanoluc®Luciferase(Nluc)-Gged SARS和MERS冠状病毒,用于快速评估RDV是否可以抑制复制。在人肺上皮细胞系中的研究表明,该化合物抑制了IC的MERS-NLUC病毒复制50.在48小时内用0.08 molus攻击细胞攻击0.03μm。单独的化合物没有向Calu细胞表现出细胞毒性,在判断的试验中,判断为判断为10μm的RDVCelltiter-Glo®Messay。进一步的工作证明了通过RT-QPCR判断的人类气道和MERS COV的病毒滴度和病毒RNA的剂量依赖性降低。SARS COV感染的小鼠模型也证明了RDV疗效。关于使用RDV的关键点是感染后以前或短暂施用以限制肺部损伤。峰值病毒滴度的给药不能纠正已经发生的肺部损伤。

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目前使用组合的洛诺瓦尔,Ritonavir和干扰素-β(LRI; 6),目前正在沙特阿拉伯的可能治疗的临床试验目前正在进行沙特阿拉伯正在进行中。切山,。(7)调查了与试验治疗相比如何进行RDV。使用Nluc标记的MERS-COV显示对RDV的几乎相同的敏感性,作为野生型病毒,在细胞模型中评价处理和RDV比单独的试验化合物或所有三种试验化合物的组合更有效。该实验室开发了一种鼠标模型,用于分析MERS-COV感染,发现具有RDV降低肺病毒载和严重肺病理学的小鼠的感染前和早期感染治疗。相比之下,用LRI略微减少病毒载量的感染前治疗而不影响其他疾病参数。后感染后LRI治疗没有减少病毒载荷或肺病理学。

agostini,(8)检查了RDV如何抑制COV复制的机制。COV基因组代码用于放电酶(外显子)以及RDRP。外显子为校对功能提供了校对功能,并且在实验室中的先前工作证明外显子活性可防止与5氟菌和醋素(9)这样的诱变敏感性。该实验室选择了模型冠状病毒,小鼠肝炎病毒(MHV),以研究COV易感性的外显子功能对RDV。用RDV或母体核苷GS-441524处理以剂量依赖性方式减少MHV病毒滴度,其RDV略高于30倍。用SARS-COV和MERS-COV获得类似的结果。敲除外显子导致100倍的提高敏感性对RDV表明野生型MHV尽管有功能性外显子系统,但仍将RDV掺入病毒RNA中。与早期的SARS-COV研究一样,RDV剂量的时间很重要。在细胞模型中,感染后-2至+ 2小时的雷代肽严重限制病毒复制。

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对任何病毒的担忧是产生抗治疗病毒的突变的潜力。MHV在GS-441524存在下传代,发现一个分离物在过去的23个通道中存活。基因组的测序显示出6个突变最常见的是MHV的RDRP中的两个突变。许多CoV基因组在包括SARS和MERS的许多COV基因组中保存了这两个残留物。将两个突变引入野生型MHV导致具有几乎相同的特征的病毒与通道23MHV具有几乎相同的特征。双突变体MHV和P23MHV仍然易于RDV,仅需要更高的剂量。双突变体MHV是一种较少的病毒,作为不同比例的野生型病毒的共感染研究几乎只在四次通道后几乎只有野生型病毒。将这两个突变引入SARS COV中产生了相同的故事,因为双突变体对RDV更耐药。本研究用Nluc标记的野生型和双突变体SARS-COV进行。使用前面描述的小鼠型号系统(4),双突变体比野生型病毒更少致病。

最近给编辑的一封信王,等等。(10)报告说,RDV是测试抗病毒板中SARS-COV-2中最有效的体外抑制剂。有趣的是,他们还观察到抗疟疾药物氯喹的大量抑制。已知氯喹抑制酸化臭氧化,并且可能干扰病毒的内化。

参考文献:

  1. Holshue,M.L.,等等。(2020)美国2019年新型冠状病毒的第一个案例。新英。J.Med。DOI:10.1056 / NEJMOA2001191
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Ralph S.律师,博士链接:https://sph.unc.edu/plofile/ralph-s-baric-phd/

Mark R. Dennison,MD链接:https://www.vumc.org/denison-lab/laboratory-mark-denison-md.

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