最大化你的时间在实验室:全面提高实验重复性与解冻和使用的细胞

许多细胞生bob注册开户物学研究人员能够说出自己部门或机构的“细胞培养向导”诚,技师20多年的经验,其细胞培养物总是不受污染,表现出可靠的倍增率,且没有表型或基因型的怪事。细胞培养需要技巧和经验。原代细胞培养能够更加困难的是,许多研究和制药应用需要原代细胞。

然而,不重复的研究结果的诸多原因中,变异的细胞培养中脱颖而出(1)。添加到细胞培养的正常挑战大流行关机细胞培养设施和仍然限制时间和频率的研究人员可以监控他们的细胞培养系和细胞培养可变性的问题进一步放大。

治疗细胞试剂

一个很好的方法,以减少基于细胞的研究可变性是使用解冻和使用的冷冻库存的方法。这涉及冻结了一大批“股票”的细胞,然后进行质量控制测试,以确保他们适当地对治疗的反应。然后,当你需要执行检验,刚刚解冻细胞的另一个小瓶从该批次开始你的分析,就像一个检测试剂!这种方法消除了需要你的细胞成长为一个特定的阶段,这可能需要数天,并推出更多的可变性。

生物制药行业已经朝着使用融解和起诉冷冻细胞的移动,一个方法,以减少可变性(3)。使用原代细胞检测是乏味的开发和难以解释,并且使转基因细胞模型与克隆细胞系已经有很多年的普遍做法。就成本和资源保存在维持在培养物中的细胞系,制备冷冻解冻和使用的细胞的银行和预先被用于监测的物质或生物的活性随着时间的推移,以确保一致性生物测定法的使用。

解冻和使用的电池的优点

对于依靠培养的细胞的任何研究的逻辑提前是考虑细胞作为关键试剂和提供他们在受控条件下制造,并且在大致相同的方式的其他试剂,例如介质,补充和血清进行测试QC-测试性能。冷冻,解冻和使用的格式已经由专门从事生产的细胞产生更多一致的响应和帮助尽量减少检测到试验变化制造商通过严格的质量控制检测了细胞,研究人员对研究人员甚至lab-到实验室。


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使用解冻和使用的细胞也可以减少时间的结果。将细胞解冻,并像任何其他试剂,而不是在使用前培养的传代和多次使用,从而消除了细胞培养物的不一致和加速的过程中研究降低,需要培养的细胞从1-2周24,用于测定所需要的时间小时。

解冻和使用的电池的应用减少了所需的细胞培养活动所需的资源和实验室空间。不仅是成本的降低,但很少人需要访问小细胞培养的空间,使身体保持距离在实验室更容易一些。

在培养的细胞减少变异

你可能无法使用解冻和使用的细胞的一切,但你仍然可以减少变异的细胞培养,尤其当你锁定后恢复您的研究活动。这里有几个技巧(1,3):

  • 总是从可信来源获得的细胞
  • 执行污染的常规检测
  • 保持一致的培养条件
  • 控制细胞数量的变化
  • 请小心处理单元时
  • 测试以验证细胞系的身份
  • 从一致和可靠的制造商获得培养基
  • 注意:所有血清补充的很多,来源

参考

  1. 李。J.(2018)如何降低细胞培养变异bob体育电竞app3月23日。
  2. TerWee,J.A.(2011)通过生物测定直接使用冷冻保存加大日常效力测定一致性和指标有效性(准备直接制版)细胞免疫学方法杂志370:65-74。
  3. 是Arduengo,M。(2012)对于成功的基于细胞分析II注意事项:细胞培养条件bob体育电竞app1月11日。

了解更多有关细胞试剂的人气?特里利斯博士,从Promega公司将在试验指导研讨会上展示“处理细胞的试剂来设计重现的测定”的高通量筛选和铅发现在周三11月18日详细了解车间和[RËgister出席会议。


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米歇尔是Arduengo

社交媒体经理Promega公司
米歇尔赢得了她的学士学位在生物学中的卫斯理学院梅肯,GA,她通过BCDB计划在博士埃默里大学在佐治亚州亚特兰大。米歇尔是在Promega公司的社交媒体经理和Promega的连接博客的主编。bob体育电竞appbob体育app二维码她喜欢迷失在一本好书,小号演奏,针织和雪鞋。

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