最大化你在实验室的时间:用待用细胞提高实验的重现性

许多细胞生bob注册开户物学研究人员可以把他们所在部门或机构的“细胞培养向导”称为“细胞培养向导”——拥有20多年经验的技术人员,他们的细胞培养总是没有污染,表现出可靠的翻倍率,并且没有显型或基因型的异常。细胞培养需要技巧和经验。原代细胞培养更加困难,许多研究和药物应用都需要原代细胞。

然而,在众多的原因未能复制研究结果,变化在细胞培养中脱颖而出(1)增加正常细胞培养的挑战大流行仍然关闭细胞培养设施和限制时间和频率研究人员可以监视他们的细胞培养,细胞培养变异性的问题是进一步放大。

把细胞当作试剂

在以细胞为基础的研究中,一种减少变异的好方法是使用冷冻储存的方法。这包括冻结大量的“储存”细胞,然后进行质量控制测试,以确保它们对处理有适当的反应。然后,无论何时你需要进行试验,只要从那批细胞中解冻另一小瓶细胞,然后开始试验——就像试验试剂一样!这种方法不需要将细胞生长到一个特定的阶段,这个阶段可能需要几天的时间,而且会带来更多的可变性。

生物制药行业已经走向thaw-and-sue冷冻细胞的使用作为一种方法来减少可变性(3)。化验使用主细胞是乏味的开发和难以解释,并使转基因细胞模型与克隆细胞系多年来一直是常见的做法。为了节省培养中维持细胞系的成本和资源,在生物测定法(生物测定法用于监测一种物质或生物制剂的长期活性,以确保一致性)之前,要准备和使用冷冻的培养细胞库。

既可使用的电池的优点

对任何依赖培养细胞的研究来说,一个合乎逻辑的进步是将细胞视为关键试剂,并在受控条件下制造它们,并对其性能进行qc测试,其方法与培养基、补充剂和血清等其他试剂的测试方法基本相同。冷冻的、待用的格式化细胞通过了由专门生产细胞的制造商进行的彻底的质量控制测试,可以产生更一致的反应,帮助减少不同分析、研究人员和研究人员甚至实验室之间的差异。


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使用使用细胞也可以减少产生效果的时间。细胞被解冻并像其他试剂一样使用,而不是在使用前培养和传代多次,消除了细胞培养的不一致性,加快了研究过程——将需要培养细胞的实验时间从1-2周缩短到24小时。

细胞的使用减少了细胞培养活动所需的资源和实验室空间。不仅成本降低了,而且更少的人需要进入小的细胞培养空间,使实验室中的物理距离更容易一些。

降低培养细胞的可变性

你可能不能在所有的事情上都使用使用细胞,但你仍然可以减少细胞培养的可变性,特别是当你在闭锁后恢复研究活动的时候。以下是一些建议(1,3):

  • 始终从可信的来源获取单元
  • 进行常规污染检测
  • 保持一致的培养条件
  • 控制单元格号码的更改
  • 操作电池时要小心
  • 验证细胞系身份的试验
  • 从稳定可靠的厂家获得培养基
  • 注意所有血清补充剂的批次和来源

参考文献

  1. 李。j . (2018)如何降低细胞培养的可变性bob体育电竞app3月23日。
  2. 特威,j.a. (2011)增加了直接使用低温保存的生物测定常规效力检测的一致性和效率(ready-to-plate)细胞j . Immunol方法370: 65 - 74。
  3. Arduengo, m (2012)成功的细胞分析的考虑II:细胞培养条件bob体育电竞app1月11日。

想了解更多关于细胞作为试剂的知识吗?11月18日星期三,Promega公司的Terry Riss博士将在高通量筛选和发现铅的试验指导研讨会上发表“将细胞作为设计可重复性试验的试剂”。了解更多关于研讨会和re要点参加会议。


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米歇尔Arduengo

社交媒体经理Promega公司
米歇尔在哈佛大学获得生物学学士学位卫斯理学院她在乔治亚州的梅肯获得了BCDB的博士学位埃默里大学在亚特兰大,佐治亚州。Michele是Promega的社交媒体经理,也是Promega Connections博客的执行编辑。bob体育电竞appbob体育app二维码她喜欢沉浸在一本好书中,吹小号,织毛衣,穿雪鞋。

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